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真菌毒素檢測技術——嘔吐毒素篇

發(fā)布時間: 2019-08-29

真菌毒素檢測技術——嘔吐毒素篇


1、?? 嘔吐毒素(DON)簡介

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,簡寫為:DON)是一種單端孢霉烯族化合物。它主要來源于鐮刀菌屬,其中禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌是主要的產毒菌種。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,與3-乙酰和15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,共同組成劇毒分子,被認為是造成免疫系統(tǒng)和神經系統(tǒng)疾病的重要因素。DON?毒素污染糧食的情況非常嚴重,許多糧谷類都會受到DON毒素的污染,如小麥、玉米、燕麥和大麥。被DON毒素污染的小麥更易發(fā)生小麥赤霉病,谷物的活力以及農產品的營養(yǎng)價值也很大程度降低,對農業(yè)經濟造成嚴重的損失。由于DON?毒素性質穩(wěn)定,一般的食品生產加工過程很難破壞其毒性,進入食物鏈后對人和動物的健康造成威脅。?DON?毒素具有很強細胞毒性,對生長較快的細胞例如淋巴細胞、胸腺細胞、骨髓造血細胞等均具有明顯的毒性作用。人食用了被DON?毒素污染的食品后,主要表現為惡心、腹瀉、嘔吐等癥狀。而動物常有的癥狀為體重減輕、厭食。雖然它的毒性較同族其它真菌毒素小,但由于它廣泛存在并大量污染糧食,對人畜構成很大危害。聯合國糧農組織和世界衛(wèi)生組織1973年聯合召開的第三次食品添加劑和污染物會議上,單端孢霉烯族毒素被定為最危險的自然發(fā)生食品污染物。列入國際研究的優(yōu)先地位。世界上絕大多數政府對人類及動物食物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量制定了嚴格的限定。因此,準確快捷地檢測出商品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇旳含量極其重要。

真菌毒素檢測技術——嘔吐毒素篇

圖1?嘔吐毒素結構圖


2、嘔吐毒素(DON)的限量標準? ??? 根據《食品中真菌毒素限量》(GB 2761-2017)標準: 規(guī)定谷物及其制品中的嘔吐毒素(DON)?的限量為1000μg /kg。


3、酶聯免疫法檢測嘔吐毒素(DON)???定量檢測原理基于酶聯免疫吸附測定(ELISA)。酶標板微孔包被有DON特異性抗體,DON標準品或樣品以及DON-HRP酶結合物(檢測溶液)加入包被有抗體的微孔中。DON-HRP酶結合物與標準品或樣品中的DON競爭結合DON抗體。未結合的DON-HRP酶結合物在洗滌步驟中洗去。加入底物溶液后,產生藍色物質。加入終止液終止反應,藍色物質變成黃色。450nm下測定吸光值,吸收光的強度與樣品和標準品中DON的濃度成反比


真菌毒素檢測技術——嘔吐毒素篇


4、免疫金標快速試紙條檢測嘔吐毒素DON? ? 定量側向層析檢測基于免疫層析測定原理。微孔中有耦合在膠體金上的DON特異性抗?體。在微孔中加入待測液,反復吹打形成懸浮混合液后開始孵育。在孵育過程中,DON(若存在)與膠體金抗體結合,達到抑制檢測線顯色的效果。將試紙條插入混合液中,液體沿試紙條垂直向上層析并層析至檢測區(qū)(檢測區(qū)內有控制線和檢測線)。測試有效時,上方的控制線會顯色。檢測線的顏色深淺與樣品中DON濃度成反比。通過使用?S-Flow?軟件及對稱定量技術可以準確測定DON的濃度。


真菌毒素檢測技術——嘔吐毒素篇


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