用途:
用于霍亂弧菌的生化鑒定。(SN標準)
配方:(g/L)
牛肉粉 | 3.0 |
?蛋白胨 | 15.0? |
乳糖 | 5.0? |
硫酸亞鐵 | 0.2? |
硫代硫酸鈉 | 0.30? |
酚紅 | 0.024? |
酵母粉 | 3.0? |
蛋白胨 | 5.0? |
葡萄糖 | 1.0? |
氯化鈉 | 20.0? |
瓊脂 | 12.0? |
附加試劑:
????無
原理:
牛肉粉、酵母粉、?蛋白胨、蛋白胨在培養(yǎng)基中作為基礎營養(yǎng)物質提供菌體細胞生長所需的氮源、碳源、維生素等;雙糖(乳糖、葡萄糖)為可發(fā)酵的碳源,細菌代謝其產酸產氣等;硫酸亞鐵及硫代硫酸鈉分別作為產硫化氫的指示劑和底物;高含量氯化鈉可滿足弧菌生長嗜鹽的要求同時可以抑制不耐鹽的細菌生長;酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。
在該培養(yǎng)基上可以觀察到三種基本的發(fā)酵類型:①僅發(fā)酵葡萄糖:斜面呈紅色(堿)/底層呈黃色(酸)。斜面呈紅色,說明葡萄糖被利用,培養(yǎng)18h-24h后,低濃度(0.1%)的葡萄糖完全被利用了,細菌開始利用培養(yǎng)基中的蛋白胨作為生長的養(yǎng)料。蛋白胨分解釋放氨,同時葡萄糖分解產生的酸部分揮發(fā),最終在培養(yǎng)基斜面中顯出堿性pH反應(紅色),然而在培養(yǎng)基底部,由于氧張力較低,分解葡萄糖產生的酸未揮發(fā)仍在底部保持酸性反應(底部呈黃色);②同時發(fā)酵葡萄糖和乳糖:斜面呈黃色(酸)/底層呈黃色(酸):葡萄糖和乳糖均被利用,由于乳糖的量較大,18h-24h內,仍有部分乳糖未分解完,斜面仍然呈酸性反應(黃色);③均不發(fā)酵葡萄糖和乳糖:由于僅利用蛋白胨產堿使斜面和底部均呈紅色。
該培養(yǎng)基另一個鑒別系統(tǒng)是細菌產硫化氫指示劑,第一步細菌在酸性環(huán)境下利用培養(yǎng)基中的無機鹽硫代硫酸鈉產生硫化氫氣體,該氣體是一種無色氣體,它與培養(yǎng)基中另外一種無機鹽硫酸亞鐵種的亞鐵離子反應生成黑色不容性物質硫化亞鐵。因此細菌產硫化氫可由培養(yǎng)基變黑判斷。此外,由于黑色硫化亞鐵沉淀可以掩蓋在底部產生的酸性反應,但由于硫化氫生成需要在酸性環(huán)境下進行,因此產生了硫化氫,即使酸性反應未被觀察到,也是存在的。
用法:
稱取64.5g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面?zhèn)溆谩?/span>
注意事項:
????無
培養(yǎng)基質控:?
